衣霉素是一种从Streptomyces lysosuperificus菌株中分离得到的核苷类抗生素，也是经典的N-糖基化抑制剂，核心作用是阻断真核细胞中蛋白质的N-连接糖基化修饰过程，广泛应用于生物化学、细胞生物学及药物研发领域。
药理研究
1、探究顺铂(DDP)联合衣霉素(TM)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y及SK-N-SH细胞的抑制作用及其机制。将人神经母细胞瘤SH-SY5Y及SK-N-SH细胞分为对照组、TM组(0.4mg/L TM处理24h)、DDP组(4mg/LDDP处理24h)和DDP+TM组(0.4mg/L TM+4mg/L DDP共处理24h)。采用CCK-8实验、平板克隆实验、划痕实验、Transwell实验分别检测各组细胞的细胞活力、增殖能力、迁移能力和侵袭能力,采用免疫印迹法检测各组细胞中JAK2-STAT3-HIF1α通路相关蛋白JAK-2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3和HIF1α的表达水平。实验结果显示,DDP+TM组两种细胞的细胞活力、增殖能力、侵袭能力、第12及24小时时的迁移能力及JAK2-STAT3-HIF1α通路各蛋白表达水平均显著低于其他三组(tLSD=2.14～78.95,P＜0.05)。因此，DDP联合TM可通过JAK2-STAT3-HIF1α通路抑制神经母细胞瘤的增殖和迁移,该结果为神经母细胞瘤的治疗提供了新思路[1]。
2、探讨小剂量衣霉素在诱导骨髓瘤细胞分化中的分子机制。采用小剂量衣霉素处理骨髓瘤细胞U266和RPMI8226,细胞形态学观察和流式细胞术分析细胞表面CD49e的表达率,ELISA法检测培养上清液中免疫球蛋白轻链的变化,实时定量PCR检测未折叠蛋白反应相关基因GRP78、GRP94的表达情况,实时定量PCR和Western blot法检测基因XBP-1u/s mRNA和蛋白表达水平。分别采用RNA干扰沉默基因XBP-1和质粒转染过表达基因XBP-1u/s后,观察细胞的分化情况。结果小剂量衣霉素可诱导骨髓瘤细胞系U266、RPMI8226细胞向成熟阶段分化，形态学观察发现细胞胞核缩小,胞质丰富,核质的比例下降,核仁减少或消失，细胞表面CD49e表达率增高,同时在细胞培养上清中分泌的免疫球蛋白轻链蛋白含量增高，未折叠蛋白反应相关的基因GRP78、GRP94表达上调,伴随着细胞分化的过程XBP-1u在转录翻译水平表达上凋,而剪切体形式XBP-1s则表达相对下调，通过RNA干扰沉默基因XBP-1的表达,则细胞分化水平发生阻断，而过表达XBP-1u则可以促进骨髓瘤细胞的分化。因此，小剂量的衣霉素以诱导骨髓瘤细胞发生分化为主,在此过程中细胞发生了未折叠蛋白反应,其中基因XBP-1u在骨髓瘤细胞分化和未折叠蛋白反应的过程中起着关键的作用[2]。
参考文献
[1] 张腾龙,孙文静,宋军莹,等. 顺铂联合衣霉素对神经母细胞瘤的抑制作用及其机制[J]. 精准医学杂志,2024,39(4):283-288. DOI:10.13362/j.jpmed.202404001.
[2] 邹剑峰,姜华,侯健. 小剂量衣霉素诱导未折叠蛋白反应和骨髓瘤细胞分化的机制研究[J]. 中华血液学杂志,2010,31(10):675-679. DOI:10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2010.10.007.