棕榈酸对硝基苯酯别名：4-硝基苯基棕榈酸酯，缩写pNPP，白色至浅米黄色结晶粉末，不溶于水；易溶于氯仿、二氯甲烷、DMF、异丙醇、热乙醇。棕榈酸对硝基苯酯是活化羧酸衍生物，可与胺、醇发生转酯/酰胺化反应，用于长链脂肪酸酰胺、脂质衍生物合成；硝基可还原为氨基，进一步修饰。
应用研究
李璟等人采用易错PCR方法对枯草芽孢杆菌脂肪酶基因lipaseA进行定向进化，并首次采用棕榈酸对硝基苯酯（pNPP）法进行96孔板高通量筛选。结果表明：第一轮易错PCR没有产生随机突变，第二轮易错PCR反应在Mn2＋浓度为0.2mmol·L-1时，产生了突变菌株。对该条件下构建的文库中124株突变菌株进行棕榈酸对硝基苯酯高通量筛选，突变株4B2的吸光度值A405为1.395，与未突变株PET32a-lipaseA（A405＝0.448）差异显著。测序结果表明，突变株4B2脂肪酶基因lipaseA有5个核苷酸位点发生了突变，其中3个是同义突变，2个是错义突变，分别是82位的天冬酰胺（AAU）突变为酪氨酸（UAU），143位的赖氨酸（AAG）突变为苏氨酸（ACG）。突变株4B2发酵上清液转化生物柴油的转酯效率较对照菌PET 32a-lipaseA有明显提高，前者为79.5％，后者为49.72％。本研究为枯草芽孢杆菌脂肪酶lipaseA转酯活性位点的探索奠定了基础[1]。
付显锋等人建立了一种新的有机相脂肪酶转酯化活性测定方法。以正己烷为溶剂，脂肪酶催化棕榈酸对硝基苯酯和正丁醇的转酯化反应为模型反应，通过测定反应液中310nm下吸光值的变化计算反应转化率。以气相色谱法对新建的紫外分光光度法进行验证，分别采用这两种方法测定了七种商品化脂肪酶的转酯化活性，两种方法所得实验结果基本一致。利用紫外分光光度检测法考察了Lipozyme TL IM脂肪酶催化转酯化的时间进程及合成活性与酶量的关系，并对Lipozyme TL IM催化转酯化的性质(最适溶剂、酰基受体特异性、醇耐受性、最优反应温度和热力学稳定性)进行了表征[2]。
参考文献
[1] 李璟,童晋,罗明银,等. 枯草芽孢杆菌脂肪酶基因 lipaseA突变文库构建及其生物柴油转酯研究[J]. 浙江农业学报,2016,28(5):864-869. DOI:10.3969/j.issn.1004-1524.2016.05.25.
[2] 付显锋,郑建永,应向贤,等. 紫外分光光度法表征Lipozyme TL IM脂肪酶转酯化活性[J]. 催化学报,2014(4):553-559. DOI:10.1016/S1872-2067(14)60053-X.