简介
6-叔丁基间甲酚常温下为固体，可溶于二氯甲烷等有机溶剂，分子带有酚羟基，具备酚类化合物的反应活性。该化合物其可作为特异性TRPV3通道激动剂，是胚胎干细胞钙信号与细胞周期机制研究的重要工具试剂，可通过激活内质网TRPV3通道调控胞内钙释。
6-叔丁基间甲酚的性状
合成
向配备温度计、气体鼓泡管与搅拌装置的反应容器中，加入对甲酚100 g、4M26B（质量分数93.6%）50 g、硫酸1.22 g，将体系内温升温至65 ℃。保持内温65 ℃，以177 mL/h的流速通入异丁烯体积分数为50%的混合丁烯，持续鼓泡反应5 h。随后通入氮气置换，冷却至室温，得到反应混合物213 g。所得反应混合物经碱水溶液洗涤处理后，采用气相色谱进行分析，得到目标产物为2-叔丁基-5-甲基苯酚[1]。
用途
6-叔丁基间甲酚作为TRPV3通道激动剂，被用作工具试剂，用于激活内质网TRPV3通道，开展胚胎干细胞胞内钙信号、细胞周期及干细胞多能性相关机制研究。例如：胚胎干细胞（ESCs）在科研与未来治疗领域潜力巨大，但其钙调控机制尚未完全阐明。本研究旨在探究小鼠胚胎干细胞（mESCs）中TRPV3通道的存在、亚细胞定位及其对细胞特征的调控作用。蛋白免疫印迹与免疫细胞化学证实TRPV3定位于小鼠胚胎干细胞的内质网。钙成像结果显示，胞外无钙条件下，TRPV3激动剂樟脑与6-叔丁基间甲酚可升高胞质钙水平；预先耗竭内质网钙库则该钙升高效应消失，说明TRPV3介导内质网钙释放。经台盼蓝排斥法与MTT检测发现，激活TRPV3会抑制小鼠胚胎干细胞增殖；细胞周期分析表明细胞发生G₂/M期阻滞，同时非活性周期蛋白依赖性激酶1表达上调；而Oct-4、Klf4、c-Myc多能性标志物表达未受影响，干细胞多能性得以维持。该研究首次证实内质网存在TRPV3，揭示了TRPV3调控胚胎干细胞细胞周期并维持其多能性的新功能[2]。
参考文献
[1] Nuno T, et al. Preparation of tert-butylcresol with reduced byproduct formation[P]. Japan: JP2001072633A, 2001-03-21.
[2] Iek Chi Lo. TRPV3 Channel Negatively Regulates Cell Cycle Progression and Safeguards the Pluripotency of Embryonic Stem Cells. Journal of Cellular Physiology 231 2 (2015): 403–413.