XRCC4是非同源末端连接（NHEJ）通路中的核心支架蛋白，可与DNA连接酶IV形成复合物，参与DNA双链断裂修复。以XRCC4抗体为研究工具，可在蛋白表达、亚细胞定位及蛋白相互作用层面解析XRCC4的功能状态。
XRCC4抗体应用于食管鳞癌伴淋巴结转移中
使用XRCC4抗体，通过免疫细胞化学方法检测RAD51、XRCC4蛋白在食管鳞癌细胞系TE-1、正常食管上皮细胞株HEEp及62例伴淋巴结转移食管鳞癌组织中的表达[1]。数据显示XRCC4在TE-1中呈阳性、在HEEp中呈阴性，XRCC4在食管鳞癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织及配对癌转移淋巴结组织。同时还发现XRCC4阳性表达率与肿瘤直径、浸润深度、分化程度、p-TNM分期等临床病理特征均无显著相关，XRCC4阳性与阴性患者的PFS差异亦无统计学意义[1]。由此得出结论，RAD51、XRCC4蛋白参与了食管鳞癌的发病机制、淋巴结转移并可能和预后相关，是潜在的食管鳞癌诊断和预后的生物标志物[1]。在这一研究中，XRCC4抗体是免疫组化和免疫细胞化学检测的关键工具，证明了XRCC4蛋白在食管鳞癌中的上调趋势和可能参与食管鳞癌的发生发展。
XRCC4抗体在肝细胞癌的可行性探讨
采用TaqMan一聚合酶链反应(TaqMan—PCR)技术分析1499例HCC患者和2045名对照者XRCC4第247密码子及XPC第939密码子的基因型，以二分类logistic回归和Cox比例风险模型分析XRCC4和XPC编码区突变与AFB，相关性HCC发病和预后的关系[2]。研究结果为，一、XRCC4和XPC编码区多态性增加HCC的发病风险，风险值分别为2.01和1.76。二、XRCC4和XPC突变基因型与AFB 暴露在HCC发病中存在相乘交互作用。三、XRCC4和XPC突变基因型调节HCC的预后[2]。该实验结论为，XRCC4和XPC编码区突变增加AFB、相关性HCC的发病风险，并影响HCC的预后。本研究中未使用XRCC4抗体，但后续可使用XRCC4抗体通过免疫组化、Western blot、免疫荧光或免疫沉淀，验证突变携带者中XRCC4蛋白表达水平、稳定性、核定位及其与DNA连接酶IV复合物形成情况，从而弥补单纯基因型研究的不足。
XRCC4抗体在三阴性乳腺癌的应用
采用免疫组化Envision法结合组织芯片技术，使用XRCC4抗体检测76例三阴性乳腺癌及配对癌旁正常乳腺组织中XRCC4蛋白表达[3]。结果显示，XRCC4在癌组织中的阳性率明显低于癌旁组织，低分化组阳性率低于高、中分化组，有淋巴结转移组阳性率高于无淋巴结转移组，未绝经组阳性率高于已绝经组，而年龄、象限、分期及Ki67之间差异无统计学意义[3]。实验结论为，XRCC4的蛋白表达阳性率与三阴性乳腺癌的发生及恶性程度有关，与肿瘤的预后还有待进一步研究[3]。该研究说明了XRCC4抗体可用于三阴性乳腺癌组织芯片免疫组化评估，同时对XRCC4低表达可能与肿瘤恶性程度及淋巴结转移相关做出警示，支持其潜在抑癌基因作用。
XRCC4抗体可衔接蛋白功能验证
采用变性高效液相色谱和DNA测序检测68例鼻咽癌活检组织中XRCC4基因突变，发现27例存在第8外显子第377位碱基C变为T，突变率为39.7%，导致126号密码子由丝氨酸变为苯丙氨酸[4]。该突变与T分期相关，局部晚期患者（T3～T4）突变率高于早期患者（T1～T2），但与N分期、临床分期、局部复发、远处转移及疾病相关死亡均无显著相关，XRCC4基因突变对生存无影响[4]。结论：鼻咽癌组织中存在XRCC4基因第8外显子突变，这种突变与鼻咽癌的放疗疗效无关，但与T分期有关，考虑XRCC4基因突变可能参与了肿瘤发展的某个阶段[4]。后续可利用XRCC4抗体通过免疫组化、Western blot或免疫荧光验证该外显子突变是否影响XRCC4蛋白表达、稳定性、核内定位及其与DNA连接酶IV的相互作用。
参考文献
[1] 张仁静, 李雨珊, 莫琳, 蹇顺海, 何欣蓉. RAD51和XRCC4在伴有淋巴结转移食管鳞癌中的表达及临床病理意义[J]. 西部医学, 2021, 33(12): 1753-1758.
[2] 黄小英, 王超, 黄炳臣, 姚金光, 黄永秩, 曾丽霞, 马韵, 夏强, 龙喜带. XRCC4与XPC编码区突变与肝细胞癌的关联性研究[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2013, 33(8): 1085-1088.
[3]孟荣荣, 应明真, 清水汪, 等. XRCC4在三阴性乳腺癌中蛋白表达的临床研究[J]. 医学研究杂志, 2013, 42(4): 18-20.
[4] 宗井凤, 潘建基, 贾静, 苏颖, 陈增, 邹长楼, 陈传本. 鼻咽癌XRCC4基因第8外显子突变与临床分期及预后的关系[J]. 中国肿瘤临床, 2012, 39(24): 2011-2014.