杜仲叶提取物
杜仲叶提取物 性质
杜仲叶提取物为杜仲科植物杜仲 (Eucommia uimoides Oliv) 的干燥叶提取物，主要药用成分为绿原酸、桃叶珊瑚甙和松酯醇二葡萄糖甙，及营养成分黄酮、脂肪酸、维生素、氨基酸、微量元素等。具有补肝肾、强筋骨、抗肿瘤、降压、调节血脂、心血管保护、预防肥胖、抗炎、抗病毒、增强免疫、延缓衰老、抗疲劳等作用。其应用非常广泛，主要用于医药、日用化工和食品等行业。本信息是由Chemicalbook的侍艳编辑整理。杜仲叶为杜仲科植物杜仲 (Eucommia uimoides Oliv) 的干燥叶。生于海拔300～500m的低山谷地、低坡。分布于陕西、甘肃、江苏、浙江、河南、四川、贵州、云南。现中国各地广泛栽培。落叶乔木，高可达20米。树皮、枝、叶折断后有密集的白丝，白丝可拉长至1厘米以上。单叶互生，叶片呈卵状椭圆形，长6~15厘米，宽3~7厘米，先端尖，基部楔形，边缘有锯齿;叶柄长1~2厘米。花单性，雌雄异株，先叶开放或与叶同时开放，无花被;雄花有雄蕊约10枚;雌花有一裸露而延长的子房，子房1室，顶端有2叉状柱头。翅果卵状长圆形。花期4—5月，果期9月。
图1为杜仲叶叶含绿原酸约3%，另含果胶、树脂、有机酸类、维生素C、生物碱、桃叶珊瑚苷、玄参苷乙酸酯、杜仲醇、阿睢告苷、雷朴妥苷及黄酮化合物等。
从杜仲叶乙醇提取物的正丁醇萃取部位中分离得到10个化合物，鉴定结构为山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷，槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷，槲皮素，槲皮素-3-O-β-D-木糖基-( 1→2) -β-D-葡萄糖苷，山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-( 1→6) -β-D-葡萄糖苷，( 2S，3S) -( － ) -花旗松素-3-O-β-D-葡萄糖苷，4-羟基肉桂酸 ，( + ) -环橄榄脂素，松脂素-β-D-葡萄糖苷，角鲨烯。
1.槲皮素：分子式C15H10O7，分子量302.23，二水合物为黄色针状结晶(稀乙醇)，在95～97℃成为无水物，熔点314℃(分解)。1g溶于290ml无水乙醇，23ml沸乙醇，溶于冰醋酸，碱性水溶液呈黄色，几乎不溶于水，乙醇溶液味很苦。
槲皮素具有较好的祛痰、止咳的作用，并有一定的平喘作用。此外还有降低血压，增加毛细管抵抗力，减少毛细管脆性，降血脂，扩张冠状动脉，增加冠脉血流量等作用。
2.绿原酸：分子式C16H18O9，分子量354.30，半水合物为针状结晶(水)。110℃变为无水化合物，熔点208℃，[α]26D-35.2°(c=2.8)。25℃水中溶解度为4%，热水中溶解度更大，易溶于乙醇及丙酮，极微溶于醋酸乙酯。
绿原酸具有广泛的抗菌作用，可提高中枢兴奋性，并有利胆、止血、增高白血球及抗病毒作用。
图2为结构式1.抗氧化损伤
杜仲叶水提取物能明显提高衰老小鼠肺组织和红细胞中的超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px) 活性，抑制丙二醛 (MDA) 产生，增加鼠脑组织中一氧化氮 (NO) 水平，提高一氧化氮合酶 (NOS)、过氧化氢酶 (CAT)活性，从而对衰老小鼠的氧化性损伤起到保护作用。
2.促进骨生长
从杜仲叶提取得到的4种化合物可促进体外培养成骨样细胞增殖和代谢。
3.免疫调节
杜仲叶浸提物制剂可增加环磷酰胺损伤小鼠脾重、脾组织RNA、蛋白合成，提高血液中自然杀伤细胞活性，脾淋巴细胞增殖加快，而对正常小鼠脾抗体形成细胞无明显影响。
4.降血压
杜仲叶冲剂能使麻醉猫血压平缓而较持久地明显降低。
5.安胎
杜仲叶浸膏可抑制垂体后叶素所致的子宫平滑肌强烈收缩，且作用随剂量增加而增强。杜仲叶冲剂明显对抗垂体后叶素引起的小鼠流产，使流产动物数明显减少，产仔数量相对增多。
6.调节血脂作用
将55%的杜仲叶、25% 的山楂、20%的葛根制成复方杜仲叶提取液，以不同的剂量给予高血脂大鼠模型，明显降低血清总胆固醇、甘油三酯( P ＜ 0. 05) ，各剂量组的血清高密度脂蛋白胆固醇有一定程度的升高，证明复方杜仲叶提取液具有一定的调节血脂作用，其中的有效成分可能为绿原酸。
7.对心脏保护作用
杜仲叶醇提取物对冠状动脉粥样硬化心脏病具有保护作用，在给予冠状动脉粥样硬化大鼠模型杜仲叶醇提物一段时间后，发现大鼠冠状动脉粥样硬化病变程度及心肌损伤程度明显减轻，证明其具有维持一氧化氮/内皮素( NO/ET) 和血栓素A2 /前列环I2( TXA2 /PGI2) 平衡、保护血管内皮细胞结构和功能的作用。
8.预防肥胖作用
杜仲嫩叶提取物对小鼠体重的影响。通过高脂饮食建立类似代谢综合征的小鼠模型，同时连续4 周给予不同组分的杜仲嫩叶提取物，观察这些提取物是否具有抗肥胖的作用。通过测定模型体重、白色脂肪组织质量、血浆甘油三酯水平及总胆固醇水平，发现富含曲徽酸的组分可以明显抑制小鼠肥胖。
9.抑菌作用
杜仲叶的乙醇和乙酸乙酯提取物对细菌和真菌都有抑制作用，而且乙酸乙酯提取物对黄曲霉和黑曲霉有特殊的抑制特征; 正丁醇和水提取物对细菌有抑制作用，但对真菌几乎没有抑制作用; 石油醚提取物几乎对细菌和真菌都没有抑制作用。最大抑菌圈直径超过了10 mm，最小抑菌浓度( MIC) 在0. 25% ～ 3. 0%。杜仲叶提取物在抑菌活性方面具有一定的热稳定性，抑菌率随时间而逐渐增加，16 h 之后基本保持不变。
10.补肝肾作用
研究发现杜仲叶水提物能够抑制四氯化碳( CCl4) 造成的肝损害，实验中用CCl4建立大鼠长期肝毒性模型，给予杜仲叶水提物后测定谷草转氨酶( GOT) 、谷丙转氨酶( GPT) 、乳酸脱氢酶( LDH) 、碱性磷酸酶( ALP) 水平，并观察病理组织切片，发现杜仲叶水提物确实能够起到保肝护肝作用，实验进一步确定其有效成分为原儿茶酸。
11.延缓衰老、抗疲劳作用
杜仲叶水提物和甲醇提取物都可促进胶原合成，达到延缓衰老的目的，效果最好的实验组含大量环稀醚萜苷; 杜仲叶甲醇提取物还可提高增龄大鼠模型的皮肤角质层转换，进一步研究发现京尼平酸、桃叶珊瑚苷、京尼平苷是提高胶原合成的主要成分。杜仲叶提取物的提取方法如下： 取一定量的杜仲叶，加10倍的水，煎煮0.5h，将水滤出;再加5倍的水，煎煮0.5h，将水滤出;将两次的滤液混合，煎熬浓缩到有效成分与水的比例为1∶1时，静止冷藏12h以上，然后在2500r/min的速度下离心30min，使之呈膏状;最后在-0.09MPa和60℃的条件下进行减压干燥，得到干膏，再按常规方法将其粉碎成粉状即可。杜仲叶中槲皮素的含量测定
色谱条件
色谱柱：YWG-C18柱(250mm×4.6mm，10μm);流动相：甲醇-8%醋酸溶液(51：49);流速：1.0ml/min;检测波长：367nm;柱温：室温。
供试品的制备
取本品粉末约2g，精密称定，加入80%乙醇溶液20ml，在水浴上回流提取3次，每次20ml，每次1h，合并提取液，滤过，回收乙醇得浸膏，先加少量水使之溶解，用95%乙醇稀释至体积约50ml，加等体积2mol/L HCl水溶液，水浴回流水解2h左右，直至水解完全，蒸干得水解产物，用甲醇溶解转移至25ml容量瓶中，并稀释至刻度摇匀，滤过。按本法色谱条件进行测定。陕西略阳和贵州遵义杜仲叶中槲皮素的含量分别为(μg/g)：160、269。将杜仲叶提取物加入到化妆品中，即可制得杜仲叶提取物化妆品。
【原料配伍】杜仲叶提取物在化妆品中质量份配比范围是0.3～1，优选为0.4～0.8，最优选为0.5。
化妆品可选自美容霜、晚霜、眼霜、洗面奶、紧肤水、按摩膏、去皱精华素和面膜等。
【产品应用】杜仲叶提取物可添加到多种形式的化妆品中，用于护肤、去皱、抗衰老。
【产品特性】杜仲叶提取物能与各种化妆品很好地融为一体，工艺简单，成本较低;化妆品使用安全，效果显著。杜仲叶提取液中通常含有较多有色物质, 使得溶液颜色较深, 如不除去则为后续纯化操作带来麻烦。因此有必要对杜仲叶提取液进行脱色, 作者选择活性炭进行脱色研究。通常用于中药提取液脱色的是粉末状活性炭, 具有很强的吸附能力, 可以将溶液中的有色物质吸附在表面上, 从而达到脱色的目的。使用前活性炭需进行预处理, 将适量粉末状活性炭(100 ～ 120 目)于120 ℃下加热活化4 ～ 5 h , 以除去所吸附的气体。杜仲叶水煎剂ip小鼠LD50分别为17.30±0.52g/kg，8.64±0.59g/kg。大鼠亚急性毒性表明，杜仲叶水煎剂及叶醇提取物1.75g/kg，3.5g/kg ig21d，未见明显毒性(肝、肾、白细胞数)。豚鼠ip 10～15g/kg，3～5d内半数死亡。犬ip 35%煎剂10 ml/d，42d后镜检对心，肝及脾组织无病变，仅肾小管上皮细胞有轻度变性，豚鼠及大鼠情况相同。甘、微辛，温。归肝、肾经。补肝肾，强筋骨，安胎。主治腰膝酸软，足膝痿弱，小便余沥，阴下湿痒，胎漏欲下，高血压等。
图1为杜仲叶叶含绿原酸约3%，另含果胶、树脂、有机酸类、维生素C、生物碱、桃叶珊瑚苷、玄参苷乙酸酯、杜仲醇、阿睢告苷、雷朴妥苷及黄酮化合物等。
从杜仲叶乙醇提取物的正丁醇萃取部位中分离得到10个化合物，鉴定结构为山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷，槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷，槲皮素，槲皮素-3-O-β-D-木糖基-( 1→2) -β-D-葡萄糖苷，山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-( 1→6) -β-D-葡萄糖苷，( 2S，3S) -( － ) -花旗松素-3-O-β-D-葡萄糖苷，4-羟基肉桂酸 ，( + ) -环橄榄脂素，松脂素-β-D-葡萄糖苷，角鲨烯。
1.槲皮素：分子式C15H10O7，分子量302.23，二水合物为黄色针状结晶(稀乙醇)，在95～97℃成为无水物，熔点314℃(分解)。1g溶于290ml无水乙醇，23ml沸乙醇，溶于冰醋酸，碱性水溶液呈黄色，几乎不溶于水，乙醇溶液味很苦。
槲皮素具有较好的祛痰、止咳的作用，并有一定的平喘作用。此外还有降低血压，增加毛细管抵抗力，减少毛细管脆性，降血脂，扩张冠状动脉，增加冠脉血流量等作用。
2.绿原酸：分子式C16H18O9，分子量354.30，半水合物为针状结晶(水)。110℃变为无水化合物，熔点208℃，[α]26D-35.2°(c=2.8)。25℃水中溶解度为4%，热水中溶解度更大，易溶于乙醇及丙酮，极微溶于醋酸乙酯。
绿原酸具有广泛的抗菌作用，可提高中枢兴奋性，并有利胆、止血、增高白血球及抗病毒作用。
图2为结构式1.抗氧化损伤
杜仲叶水提取物能明显提高衰老小鼠肺组织和红细胞中的超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px) 活性，抑制丙二醛 (MDA) 产生，增加鼠脑组织中一氧化氮 (NO) 水平，提高一氧化氮合酶 (NOS)、过氧化氢酶 (CAT)活性，从而对衰老小鼠的氧化性损伤起到保护作用。
2.促进骨生长
从杜仲叶提取得到的4种化合物可促进体外培养成骨样细胞增殖和代谢。
3.免疫调节
杜仲叶浸提物制剂可增加环磷酰胺损伤小鼠脾重、脾组织RNA、蛋白合成，提高血液中自然杀伤细胞活性，脾淋巴细胞增殖加快，而对正常小鼠脾抗体形成细胞无明显影响。
4.降血压
杜仲叶冲剂能使麻醉猫血压平缓而较持久地明显降低。
5.安胎
杜仲叶浸膏可抑制垂体后叶素所致的子宫平滑肌强烈收缩，且作用随剂量增加而增强。杜仲叶冲剂明显对抗垂体后叶素引起的小鼠流产，使流产动物数明显减少，产仔数量相对增多。
6.调节血脂作用
将55%的杜仲叶、25% 的山楂、20%的葛根制成复方杜仲叶提取液，以不同的剂量给予高血脂大鼠模型，明显降低血清总胆固醇、甘油三酯( P ＜ 0. 05) ，各剂量组的血清高密度脂蛋白胆固醇有一定程度的升高，证明复方杜仲叶提取液具有一定的调节血脂作用，其中的有效成分可能为绿原酸。
7.对心脏保护作用
杜仲叶醇提取物对冠状动脉粥样硬化心脏病具有保护作用，在给予冠状动脉粥样硬化大鼠模型杜仲叶醇提物一段时间后，发现大鼠冠状动脉粥样硬化病变程度及心肌损伤程度明显减轻，证明其具有维持一氧化氮/内皮素( NO/ET) 和血栓素A2 /前列环I2( TXA2 /PGI2) 平衡、保护血管内皮细胞结构和功能的作用。
8.预防肥胖作用
杜仲嫩叶提取物对小鼠体重的影响。通过高脂饮食建立类似代谢综合征的小鼠模型，同时连续4 周给予不同组分的杜仲嫩叶提取物，观察这些提取物是否具有抗肥胖的作用。通过测定模型体重、白色脂肪组织质量、血浆甘油三酯水平及总胆固醇水平，发现富含曲徽酸的组分可以明显抑制小鼠肥胖。
9.抑菌作用
杜仲叶的乙醇和乙酸乙酯提取物对细菌和真菌都有抑制作用，而且乙酸乙酯提取物对黄曲霉和黑曲霉有特殊的抑制特征; 正丁醇和水提取物对细菌有抑制作用，但对真菌几乎没有抑制作用; 石油醚提取物几乎对细菌和真菌都没有抑制作用。最大抑菌圈直径超过了10 mm，最小抑菌浓度( MIC) 在0. 25% ～ 3. 0%。杜仲叶提取物在抑菌活性方面具有一定的热稳定性，抑菌率随时间而逐渐增加，16 h 之后基本保持不变。
10.补肝肾作用
研究发现杜仲叶水提物能够抑制四氯化碳( CCl4) 造成的肝损害，实验中用CCl4建立大鼠长期肝毒性模型，给予杜仲叶水提物后测定谷草转氨酶( GOT) 、谷丙转氨酶( GPT) 、乳酸脱氢酶( LDH) 、碱性磷酸酶( ALP) 水平，并观察病理组织切片，发现杜仲叶水提物确实能够起到保肝护肝作用，实验进一步确定其有效成分为原儿茶酸。
11.延缓衰老、抗疲劳作用
杜仲叶水提物和甲醇提取物都可促进胶原合成，达到延缓衰老的目的，效果最好的实验组含大量环稀醚萜苷; 杜仲叶甲醇提取物还可提高增龄大鼠模型的皮肤角质层转换，进一步研究发现京尼平酸、桃叶珊瑚苷、京尼平苷是提高胶原合成的主要成分。杜仲叶提取物的提取方法如下： 取一定量的杜仲叶，加10倍的水，煎煮0.5h，将水滤出;再加5倍的水，煎煮0.5h，将水滤出;将两次的滤液混合，煎熬浓缩到有效成分与水的比例为1∶1时，静止冷藏12h以上，然后在2500r/min的速度下离心30min，使之呈膏状;最后在-0.09MPa和60℃的条件下进行减压干燥，得到干膏，再按常规方法将其粉碎成粉状即可。杜仲叶中槲皮素的含量测定
色谱条件
色谱柱：YWG-C18柱(250mm×4.6mm，10μm);流动相：甲醇-8%醋酸溶液(51：49);流速：1.0ml/min;检测波长：367nm;柱温：室温。
供试品的制备
取本品粉末约2g，精密称定，加入80%乙醇溶液20ml，在水浴上回流提取3次，每次20ml，每次1h，合并提取液，滤过，回收乙醇得浸膏，先加少量水使之溶解，用95%乙醇稀释至体积约50ml，加等体积2mol/L HCl水溶液，水浴回流水解2h左右，直至水解完全，蒸干得水解产物，用甲醇溶解转移至25ml容量瓶中，并稀释至刻度摇匀，滤过。按本法色谱条件进行测定。陕西略阳和贵州遵义杜仲叶中槲皮素的含量分别为(μg/g)：160、269。将杜仲叶提取物加入到化妆品中，即可制得杜仲叶提取物化妆品。
【原料配伍】杜仲叶提取物在化妆品中质量份配比范围是0.3～1，优选为0.4～0.8，最优选为0.5。
化妆品可选自美容霜、晚霜、眼霜、洗面奶、紧肤水、按摩膏、去皱精华素和面膜等。
【产品应用】杜仲叶提取物可添加到多种形式的化妆品中，用于护肤、去皱、抗衰老。
【产品特性】杜仲叶提取物能与各种化妆品很好地融为一体，工艺简单，成本较低;化妆品使用安全，效果显著。杜仲叶提取液中通常含有较多有色物质, 使得溶液颜色较深, 如不除去则为后续纯化操作带来麻烦。因此有必要对杜仲叶提取液进行脱色, 作者选择活性炭进行脱色研究。通常用于中药提取液脱色的是粉末状活性炭, 具有很强的吸附能力, 可以将溶液中的有色物质吸附在表面上, 从而达到脱色的目的。使用前活性炭需进行预处理, 将适量粉末状活性炭(100 ～ 120 目)于120 ℃下加热活化4 ～ 5 h , 以除去所吸附的气体。杜仲叶水煎剂ip小鼠LD50分别为17.30±0.52g/kg，8.64±0.59g/kg。大鼠亚急性毒性表明，杜仲叶水煎剂及叶醇提取物1.75g/kg，3.5g/kg ig21d，未见明显毒性(肝、肾、白细胞数)。豚鼠ip 10～15g/kg，3～5d内半数死亡。犬ip 35%煎剂10 ml/d，42d后镜检对心，肝及脾组织无病变，仅肾小管上皮细胞有轻度变性，豚鼠及大鼠情况相同。甘、微辛，温。归肝、肾经。补肝肾，强筋骨，安胎。主治腰膝酸软，足膝痿弱，小便余沥，阴下湿痒，胎漏欲下，高血压等。