简介
十五碳二元酸（DC15）为白色至类白色粉末，熔点约112 ℃，可溶于热醇、丙酮、醚类，几乎不溶于水；它是制备麝香酮、环十五酮等名贵香料的关键原料，工业上可由微生物转化正十五烷或α-硝基酮氧化裂解制得，并采用C18-液相色谱内标法（月桂酸内标，210 nm检测）进行高准确度定量分析。
十五碳二元酸的性状
合成
方法一：将菌株接种于含1 % D-葡萄糖、0.3 % Difco酵母提取物、0.3 % 培根蛋白胨和1.5 %琼脂的YM斜面，4 ℃保存。发酵培养基分两步配制：①种子液含正戊烷10 g、(NH₄)₂SO₄ 1 g、K₂HPO₄ 6 g、KH₂PO₄ 2 g、MgSO₄·7H₂O 1 g、酵母提取物3 g、柠檬酸1 g、山梨醇10 g及微量元素（各20 mg）和蒸馏水1000 mL，pH 7.5；②转化液仅用20 g正戊烷溶于1000 mL 0.5 mol/L磷酸盐缓冲液（pH 7.5）。500 mL锥形瓶中加入5 mL静息细胞悬液与25 mL转化液，30 ℃、200 r/min振荡培养；期间每6 h滴加1 mol/L KOH维持pH 7.5，并视实验于6–72 h内终止。转化结束后离心收集菌体，蒸馏水洗涤两次并重悬，经萃取、酸化、结晶即得目标产物十五碳二元酸[1]。
方法二：：将α -硝基酮（0.7 mmol）溶于4.2 ml的MeOH溶液中，加入0.5 M Na2HPO4 （25 ml）溶于1 N NaOH中，70℃加热1-4 h，然后将Oxone®（1.75 mmol）溶于水（3 ml）加入冷溶液（r. t.）中。4小时后，用盐水（10ml）稀释混合物，用10%的盐酸溶液酸化至pH=2，用乙酸乙酯（3 × 20ml）提取。结合的有机层用盐水（10ml）洗涤，在Na2SO4上干燥，蒸发得到十五碳二元酸，收率98%[2]。
含量测定方法
采用液相色谱内标法建立了环十五内酯合成中的重要化合物十五碳二元酸的定量分析方法。通过实验确定了最优色谱条件：色谱柱C18（4.6×250 mm），以月桂酸为内标物，流动相为甲醇：乙腈：水＝80：5：15（0.1%三氟乙酸），流速为1.2 mL/min，检测波长为210 nm。方法的相关性好（γ＞0.9990），样品测定的相对标准偏差RSD＜1%，加标回收率为99.25%，检出限为4.543×10⁻⁴ g/（s·L）[3]。
参考文献
[1] Stimulation of n-alkane conversion to dicarboxylic acid by organic solvent- and detergent-treated microbes. By: Chan, Err Cheng; et al. Applied Microbiology and Biotechnology (1991), 34(6), 772-7.
[2] A new, modulated, oxidative ring-cleavage of α-nitro cycloalkanones by Oxone. Synthesis of α,ω-dicarboxylic acids and α,ω-dicarboxylic monomethyl esters. By: Ballini, Roberto; et al. Synlett (1998), (10), 1049-1050.
[3] 江菲菲,彭阳峰,童天中,等.高效液相色谱法测定1,15-十五碳二元酸的方法研究[J].香料香精化妆品, 2010(05):27-29.DOI:10.3969/j.issn.1000-4475.2010.05.008.